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上海笃玛生物科技有限公司

ELISA试剂盒, 培养基, 血清, 抗体, 标准品, 生化试剂

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DM人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒
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产品: 浏览次数:301DM人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒 
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最后更新: 2017-11-25 16:38
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详细信息

“DM人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒”参数说明

是否有现货: 种类: 诊断抗原
有效期: 6个月 型号: Dm11129
规格: 96t/48t 商标: Dm
包装: 盒装 产量: 36000

“DM人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒”详细介绍

人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒样品收集:1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。5.其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测具体处理方法可参考:http://www.elabscience.cn/index.php/resources/view/aid/17671.jsp6.样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。7.样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融。8.如果您的样品中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒操作步骤实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒注:1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒相关产品:人生长调节致癌基因α(GROα/CXCL1)酶联免疫试剂盒HumanGROα/CXCL1(GrowthRegulatedOncogeneAlpha)ELISAKit人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78)酶联免疫试剂盒HumanENA-78(EpithelialNeutrophilActivatingPeptide78)ELISAKit人粒细胞趋化蛋白2(GCP-2)酶联免疫试剂盒HumanGCP-2(GranulocyteChemotac
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